# 沙砾生物携手天泽云泰在Molecular Therapy期刊发表基于AaCas12bMAX编辑的细胞疗法安全性与功能性研究成果

上海沙砾生物科技有限公司（以下简称“沙砾生物”）与上海天泽云泰生物医药有限公司（以下简称“天泽云泰”）合作，在Cell Press旗下期刊《Molecular Therapy》（影响因子12）上发表了题为“High-Fidelity AaCas12bMAX Enables the Development of an Engineered T Cell Therapy with Enhanced Safety and Functional Fitness”的研究论文。

Fig 1. 文章亮点概述

该研究基于沙砾生物自主开发验证的基因敲除系统KOReTIL®，结合天泽云泰的高保真基因编辑工具AaCas12bMAX，系统性地建立了一套sgRNA筛选验证流程，并构建了符合FDA/NMPA国际注册申报标准的基因编辑安全性评价体系（Fig 1）。为验证该技术的临床应用前景，研究团队全面的测试比较了AaCas12bMAX与传统SpCas9在编辑肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）产品中的安全性与功能性指标。

在脱靶效应分析中，研究采用SITE-seq（在裸露DNA水平检测脱靶）与adGUIDE-seq（在细胞内环境检测脱靶）两种方法，全面评估了两种编辑系统的脱靶情况。结果显示，AaCas12bMAX系统在编辑过程中产生的脱靶位点显著少于SpCas9系统，且未发现跨实验方法与不同供体间重复出现的脱靶位点 (Fig 2J, 原文Fig 4J )。染色体结构变异分析进一步表明，AaCas12bMAX对基因组稳定性的影响更小，展现出明显的安全性优势 （Fig 2K, 原文 Fig 4K）。

Fig 2. AaCas12bMAX和SpCas9的编辑安全性比较

与SpCas9编辑产品相比，经AaCas12bMAX编辑的TIL产品展现出更优的细胞状态与功能，具体表现为更高的细胞活性与扩增能力，而SpCas9编辑组则早期和晚期凋亡细胞比例更高 （Fig 3D-3F, 原文Fig 4D-4F）。CD39⁻CD69⁻ T细胞作为TIL疗法中的重要标志物，其比例与临床预后呈正相关1。研究显示，AaCas12bMAX编辑的TIL产品中CD39⁻CD69⁻ T细胞比例更高 （Fig 3G, 原文Fig 4G），同时耗竭型T细胞（PD-1⁺、LAG-3⁺、CD38⁺CD101⁺）的比例更低 （Fig 3H, 原文Fig 4H）。在功能层面，与A375黑色素瘤细胞的共培养实验证实，AaCas12bMAX和SpCas9系统编辑的TIL引起肿瘤细胞的凋亡水平（caspase-3/7）均显著高于未编辑TIL，抗肿瘤杀伤能力具有可比性（Fig 3I, 原文Fig 4I）。

Fig: GT101治疗实体瘤临床疗效

本研究首次依据监管指南，系统性建立了sgRNA筛选与编辑安全性评价体系，为行业同类产品开发提供重要参考。通过与SpCas9进行头对头比较，证明了AaCas12bMAX是相较于Cas9同样高效但更为精准的基因编辑方案。研究还系统比较了不同CRISPR编辑系统对细胞产品状态与功能的表型影响及潜在机制，为开发更安全、更高效的新一代基因编辑型细胞疗法奠定了坚实的技术基础，并提供了可行的开发策略。基于AaCas12bMAX系统的双重基因敲除TIL产品，已同步向中国国家药品监督管理局（NMPA）与美国食品药品监督管理局（FDA）提交新药临床试验（IND）申请。

得益于沙砾生物自主开发的 KOReTIL®高效基因敲除平台所沉淀的丰富数据和成熟工艺，研究团队高效完成了从研究构想到成果发表的全过程。KOReTIL®平台具备高效基因敲除（>90%）、多靶点并行验证、稳定扩增及产业化适配等优势。沙砾生物利用该技术，已实现对百余免疫抑制靶点的编辑与功能验证，并申请国际专利50余项。KOReTIL®平台取得的前期成果，为本项目的sgRNA筛选和编辑安全性研究架构的搭建以及产品工艺开发提供了强有力支撑。

衷心感谢作为共同作者参与本研究的珠海舒桐医疗科技有限公司和纳昂达（南京）生物科技有限公司所提供的大力支持；同时感谢近岸蛋白质科技股份有限公司提供AaCas12bMAX酶支持本研究及产品开发。

原文链接：https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2025.09.009

参考文献：

1. Krishna, S., Lowery, F.J., Copeland, A.R., Bahadiroglu, E., Mukherjee, R., Jia, L., Anibal, J.T., Sachs, A., Adebola, S.O., Gurusamy, D., et al. (2020). Stem-like CD8 T cells mediate response of adoptive cell immunotherapy against human cancer. Science 370, 1328-1334. 10.1126/science.abb9847.

关于沙砾生物

沙砾生物成立于2019年，是一家专注于肿瘤免疫细胞治疗，以TIL药物为代表研发管线的创新型医药公司。沙砾生物已完成多轮股权融资，得到了多家知名创投基金的支持。沙砾生物自主研发的GT101注射液是中国首个获批注册临床的TIL药物，目前进入关键二期临床试验。沙砾生物的全球首款膜结合IL-15复合物的TIL产品GT201注射液，已经完成了中美IND双报并获准进入I期临床。

公司的核心研发平台包括StemTexp®干性TIL扩增技术平台、StaViral®病毒稳转株工艺、ImmuT Finder®免疫调节靶点发现平台、KOReTIL®高效基因敲除系统，并依托平台开发了一系列下一代基因编辑型TIL药物。沙砾生物拥有国际领先的技术储备和产业资源，旨在打造开创性的实体瘤细胞药物，为广大肿瘤病患带来新的希望。

关于天泽云泰

天泽云泰2020年3月注册成立于中国上海，致力于将前沿的基因及细胞治疗技术，转化为临床可及的治疗方法，以期造福更多患者。

天泽云泰拥有具有自主知识产权的ViVec®AAV载体筛选平台、ViLNP®脂质纳米粒技术平台、ViCas®CRISPR基因编辑技术平台和ViHiYi®AAV高产技术平台，通过基因替代、基因调控和基因编辑等策略，开发治疗中枢神经系统疾病、代谢及血液系统疾病、眼科疾病等领域的创新基因治疗药物，拥有包括多个潜在First-in-class产品的多元化管线。目前，天泽云泰已经获得多家知名基金的多轮投资，分别在张江高科技园区、北京巢生实验室、临港新片区和外高桥自贸区建成面积2,500平米的基因治疗研发运营中心、基因编辑技术研发中心、3,000平米的基因治疗中试生产车间和9,500平方米GMP商业化生产车间。

关于CRISPR-AaCas12bMAX

天泽云泰的科学创始人李伟教授在国际上最早报道了经改造的Cas12b可实现哺乳动物系统的基因编辑，这是继Cas9、Cas12a之后的第三类高效的哺乳动物基因组编辑工具。天泽云泰独家授权引进了上述基因编辑工具相关技术专利，并在此基础上进行了全方位的工业级和临床级打磨，构建了自主知识产权的多场景ViCas®CRISPR编辑技术平台，其中包括VG-Cas12bMax、VG-Cas12iMax、VG-Cas12iHiFi等识别多种PAM序列的高效编辑器，独有的gRNA骨架和稳定化定点修饰策略、高活性编辑器重组蛋白、以及mRNA-LNP编辑系统等，以此为基础搭建自身丰富的基因编辑产品管线的同时，也为其他细胞和基因治疗企业提供这一新一代的高效率低脱靶的基因编辑工具，解决基因编辑工具核心专利被美国垄断的问题。

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